Методы разделения смесей веществ

Методы разделения смесей веществ

Способы биохимических исследовательских работ

Способы исследования на уровне целостного организма

Исслед. баланса веществ:соотношение меж количеством поступившего в орг-м вещества и выделившихся прод-в его распада.Пример: определение баланса N, C

Исследование энергетического баланса: Определяют соотнош. меж энергетической ценностью питательных веществ, в составе дневного рациона, и энергетическими растратами организма за тот Методы разделения смесей веществ же период

Изотопный способ: Введение изотопных меток («меченых» атомов) позволяет проследить путь «меченого» атома в обмене веществ. Пример: радиоиммуноанализ гормонов, присутствующих в микроколичествах.

Способы исследования на клеточном уровне

Способы экстрагирования и гомогенизации клеток :1)Начальный материал – свежайшая ткань либо осадок спрессованных клеток мельчайшего организма, получаемый центрифугированием. 2)Ткань размельчают в мясорубке(либо пестиком в ступке с Методы разделения смесей веществ кварцевым песком) либо в гомогенизаторе ; 3)Клеточки бактерий разрушают при помощи ультразвука либо продавливанием через пресс под высочайшим p; 4)Сырой гомогенат процеживают и центрифугируют; 5)Более большие частички клеток осаждаются при низких скоростях вращения (неразрушившиеся клеточки, ядра), потом более маленькие (митохондрии, лизосомы, потом рибосомы, осколки ЭПС)

Определение в Методы разделения смесей веществ тканях и био жидкостях содержания отдельных соединений и товаров их перевоплощений

Цветные реакции. Определ.соединение с соответ. реактивом дает окраш. продукт

Спектральные и флюорометрические способы и приемы оптического сканирования: 1)воздействие на вещество электрического излучения – УФ-, ИК-спектроскопия и спектроскопия ЯМР. 2)Приборы: электрофотоколориметры, спектрофотометры, спектрофлюорометры, огненные фотометры и др. 3)Прижизненные способы: оптическое зондирование объекта Методы разделения смесей веществ позволяет в почти всех плоскостях («строках»), не останавливая происходящие процессы, проследить за динамикой составляющих их реакций

Способы разделения консистенций веществ

Гидролиз биополимеров: 1)Практически все биополимеры нестабильны и в реакции с водой распадаются на мономеры (гидролизуются); 2)Гидролиз катализируют ионы Н+, ОН– и ферменты; 3)Гидролиз может быть полным либо частичным, неспецифическим либо направленным Методы разделения смесей веществ на определенные связи; 4)После гидролиза определяют структуры приобретенных фрагментов и узнают структуру полимера в целом разными способами

Электрофорез: основан на различной скорости перемещения молекул в электронном поле. Методы:-на бумаге

-гель-электрофорез: позволяет поделить молекулы и по размеру, и по электронному заряду

Хроматография– различное рассредотачивание веществ меж подвижной (поток воды либо газа) и Методы разделения смесей веществ недвижной (жесткой либо водянистой) фазами. По нраву фаз, при помощи которых делается разделение, – газовая, газожидкостная и жидкостная. По типу взаимодействия разделяемых веществ с фазами – адсорбционная, распределительная, ионообменная

Диализ и ультрафильтрация: 1)Основаны на разнице в размерах молекул; 2)Используют узкую полупроницаемуюмембрану, которая пропускает малые молекулы, а большие задерживает

Гель-фильтрация (гель Методы разделения смесей веществ-хроматография, способ молекулярных сит либо ситовая хроматография) : 1)То же, что диализ, но в качестве барьера употребляется разные гели с трехмерной сетчатой структурой: декстраны (сефадекс), полиакриламиды, пористые силикагели, цеолиты и др. ; 2)При разделении консистенции маленькие молекулы диффундируют через поры набухшего в растворителе геля, а большие молекулы проходят через место меж Методы разделения смесей веществ частичками геля; 3)При промывании геля растворителем сначала передвигаются большие молекулы, а потом маленькие

Спектральные способы : 1)Разделении веществ дающих разные диапазоны поглощения лучей света.

Способы исследования структуры веществ

Рентгеноструктурный анализ : механизм работы рентгена.

Ядерный магнитный резонанс: 1)Поглощение электрических волн в радиочастотном спектре ядрами атомов, владеющими магнитным моментом; 2)Поглощение кванта энергии происходит Методы разделения смесей веществ, когда ядра находятся в сильном магнитном поле ЯМР-спектрометра; 3)Разные по хим окружению ядра поглощают энергию в несколько отличающемся по напряжению магнитном поле (либо, при неизменном напряжении, несколько отличающиеся по частоте радиочастотные колебания); 4)В итоге выходит диапазон ЯМР вещества, в каком магнитно несимметричные ядра характеризуются определенными сигналами – «химическими сдвигами Методы разделения смесей веществ» по отношению к какому-либо эталону; 5)Диапазоны ЯМР дают возможность найти число атомов данного элемента в соединении и число и нрав других атомов, окружающих данный

Электрический парамагнитный резонанс (ЭПР): 1)Употребляется резонансное поглощение излучения электронами

Электрическая микроскопия: Владея разрешением ~0,4 нм, электрический микроскоп позволяет «увидеть» молекулы белков и нуклеиновых кислот, также детали строения клеточных Методы разделения смесей веществ органелл;

Способы выделения и чистки белков: После выбора источника выделения белка, проводится экстракция его из ткани. Концентрирование. Проводят методом осажд. белка с следующим растворением осадка в наименьшем объеме. Обычно при всем этом употребляют сульфат аммония либо ацетон. Конц. белка в начальном растворе должна быть не меньше 1 мг/мл. Термическая Методы разделения смесей веществ денатурация. На исходном шаге чистки для разделения белков время от времени употребляют термическую обработку. Она эффективна, если белок относительно устойчив в критериях нагревания, в то время как сопутствующие белки денатурируют. При всем этом варьируют рН раствора, длительность обработки и температуру. В приобретенной консистенции белки отличаются друг от друга растворимостью, молекулярной Методы разделения смесей веществ массой, величиной суммарного заряда молекулы, относительной стабильностью и т.д. Осаждение белков органическими растворителями.Это один из старенькых способов. Он играет важную роль при чистке белков в промышленных масштабах. В большинстве случаев употребляют растворители-этанол и ацетон. По мере возрастания концентрации органического растворителя понижается способность воды к сольватации заряженных гидрофильных Методы разделения смесей веществ молекул фермента. Происходит понижение растворимости белков до уровня, при котором начинается агрегация и осаждение. Принципиальным параметром, влияющим на осаждение, является размер молекулы белка. Чем больше молекула, тем ниже концентрация органического растворителя, вызывающая осаждение белка. Гельфильтрация При помощи способа гельфильтрации можно стремительно поделить макромолекулы в согласовании с их размерами Методы разделения смесей веществ. Носителем для хроматографии является гель, играющий роль молекулярного сита. Электрофорез Молекула белка в растворе при любом рН, отличающемся от её изоэлектрической точки, имеет некоторый средний заряд. Белок движется в электронном поле. Движущая сила определяется величиной напряженности электронного поля Е умноженной на суммарный заряд частички z. Этой силе противостоят Методы разделения смесей веществ силы вязкости среды, пропорциональные коэффициенту вязкости η, радиусу частички r и скорости v.; Е ·z = 6πηrv.

Определение молекулярной массы белка.Масс-спектрометрия (масс-спектроскопия, масс-спектрография) — способ исследования вещества оковём определения дела массы к заряду. Белки способны получать множественные положительные и отрицательные заряды. Атомы хим частей имеют специфическую массу Методы разделения смесей веществ. Таким макаром, четкое определение массы анализируемой молекулы, позволяет найти её элементный состав. Масс-спектрометрия также позволяет получить важную информацию об изотопном составе анализируемых молекул.

Способы выделения и чистки ферментовВыделение ферментов из био материала – единственный реальный метод получения ферментов. Источники фермента:ткани; бактерии, выращенные на среде, содержащей соответственный субстрат; клеточные структуры (митохондрии Методы разделения смесей веществ и др.). Нужно поначалу выделить нужные объекты из био материала.

Способы выделения ферментов: Экстракция (перевод в раствор):буферным веществом; высушивание ацетоном;обработка материала консистенцией бутанола с водой;экстракция разными органическими растворителями, аква смесями детергентов;обработка материала перхлоратами, гидролитическими ферментами (липазами, нуклеазами, протеолитическими ферментами)

Фракционирование. Причины, действующие на Методы разделения смесей веществ результаты: рН, концентрация электролитов. Необходимопостоянно определять активность фермента.

-фракционное осаждение при изменении рН

-фракционная денатурация нагреванием

-фракционное осаждение органическими растворителями

-фракционирование солями – высаливание

фракционная адсорбция (А. Я. Данилевский): адсорбент заносят в раствор фермента, потом каждую порцию отделяют центрифугированием

-если фермент адсорбируется, то его отделяют, потом элюируют с адсорбента

-если фермент не адсорбируется, то обработку адсорбентом употребляют для Методы разделения смесей веществ отделения балластных веществ

-ферментный раствор пропускают через колонку с адсорбентом и собирают фракции

Ферменты адсорбируются избирательно :колоночная хроматография;электрофорез; кристаллизация – получение высокоочищенных ферментов.


metodi-resheniya-sistem-ekonometricheskih-uravnenij.html
metodi-resheniya-trigonometricheskih-uravnenij.html
metodi-resheniya-zadach-po-delimosti-chisel.html